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問題一：細胞系劃痕實驗為什么這么重要

答：因為細胞系劃痕實驗是觀察細胞系遷移活動的重要技術(shù)手段，而且簡單快捷、經(jīng)濟實惠（劃重點?。?。

問題二：細胞系劃痕實驗為什么一般選擇6孔板

答：因為6孔板大小適中，可保證有相當(dāng)距離的平直劃痕，便于觀察;當(dāng)然若是需要高通量初篩時，也可以用12或者24孔板。

問題三：為什么細胞系接種密度要求過夜100%融合

答：如果過夜后細胞系=沒有100%融合，雖然可以適當(dāng)延長培養(yǎng)時間，但因細胞系密度已經(jīng)很大，所以細胞系狀態(tài)會逐漸變差，后續(xù)細胞系可能不遷移而是凋亡。

問題四：怎樣避免細胞系增殖對細胞系遷移實驗造成的假陽性結(jié)果

答：操作如下

1、使用無血清或低血清培養(yǎng)基(<2%)可降低細胞系增殖對實驗結(jié)果的影響

2、一般認為24h為細胞系的一個周期，在選取合適的時間點(6，12，24h)檢測劃痕寬度時，不要超過細胞系一個周期的時間

3、如果要單純考慮細胞系遷移，可以先用(1ug/ml)處理1h，抑制細胞系的分裂。

問題五：結(jié)果怎樣拍照

答：按照6孔板背后畫線的垂直方向劃痕，可以形成若干交叉點，劃痕一次與5條定位線相交，就有10個可固定監(jiān)測點，以解決了前后觀察時位置不固定的問題。

問題六：細胞系不遷移怎么回事？

答：避開細胞系狀態(tài)的影響，需要考慮細胞系自身的遷移能力，并非所有細胞系都適合劃痕實驗，以乳腺癌為例，乳腺癌細胞系MCF-7幾乎很難遷移，而MDA-MB-231具有很強遷移性。

問題七：結(jié)果統(tǒng)計中，細胞系計數(shù)和統(tǒng)計面積那個好用？

答：根據(jù)細胞系劃痕實驗的實驗結(jié)果選擇。如果細胞系遷移輪廊比較清晰，并且遷移數(shù)量不多，我們可以選擇細胞系計數(shù)；但如果細胞系數(shù)比較多，連片生長，那么統(tǒng)計面積比細胞系計數(shù)的方式更簡便且客觀。

問題八：細胞系劃痕技術(shù)有什么不足嗎

答：細胞系劃痕實驗的不足主要包括：

1、適用的細胞系類型范圍小，一是需要遷移強的細胞系，而且對無血清的環(huán)境有較強的忍受力(至少24h)12h細胞系凋廣就超過50%。

2、自身操作的實驗誤差，如劃痕距離不一致等。

以上是通蔚生物帶您了解實驗室中細胞系培養(yǎng)的方法及注意事項，您知道了嗎？上海通蔚生物將進一步加強人才培養(yǎng)、產(chǎn)品創(chuàng)新，持續(xù)不斷地提升企業(yè)核心竟爭力，實現(xiàn)具有高科技產(chǎn)業(yè)體系、知識化創(chuàng)業(yè)團隊的化大集團企業(yè)，更好、更快捷、更的服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域，迎接新一輪世界經(jīng)濟一體化所帶來的機遇與挑戰(zhàn)。